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强脉冲光治疗对睑板腺功能障碍患者泪液蛋白和脂质的影响

2022-06-24 干眼系列


Effect of intense pulsed light therapy on tear proteins and lipids in meibomian gland dysfunction
Ahmed SA, Taher IME, Ghoneim DF, Safwat AE.J Ophthalmic Vis Res 2019;14:3-10.


强脉冲光治疗MGD对泪液蛋白和脂质的影响

目的:探讨新型强脉冲光(IPL)技术对睑板腺功能障碍(MGD)患者泪液蛋白和脂质层的影响。

方法:对12例MGD患者的24只眼进行了5次下眼睑强脉冲光的治疗(565~1400nm)。在IPL治疗前和治疗后的2周时间立即对泪液样本进行评估,其中包括蛋白质浓度的测量(使用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方式测定)、脂质剖面评估和磷脂薄层色谱(TLC)进行电泳迁移的检测。

结果:IPL治疗后泪液蛋白浓度和分子量均有明显改善。最显著的影响是泪液溶菌酶、乳铁蛋白和白蛋白的分子量。泪液脂质显示总脂质、甘油三酯、胆固醇和磷脂的浓度均有所改善。在TLC上,MGD患者的泪液中阴离子磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇和磷脂酰丝氨酸含量显著降低,但两性离子中级性磷脂酰胆碱含量正常。这些阴性脂质离子在IPL治疗后有明显恢复。

结论:IPL治疗MGD患者有效。提高了泪液蛋白质和脂质的含量和组成。阴离子磷脂比其他两性磷脂对IPL治疗反应更为敏感。



文献数据分析图片


一、总蛋白质含量


下图显示了对照组、IPL治疗前患者和治疗2周后患者的泪液蛋白浓度。对照组和MGD患者的总蛋白浓度分别为53.65±1.2mg/ml和72.13±1.98mg/ml(P<0.001)。IPL治疗2周后,泪液蛋白含量明显改善,为56.23±2.19mg/ml,与对照组比较相比具有显著性差异(P<0.05)


IPL治疗前后的泪液蛋白浓度


二、SDS-PAGE


IPL治疗前对照组和患者泪液蛋白的SDS-PAGE扫描模式如下图所示。对照模式由9个表征组成,这些组分代表不同分子量、宽度和强度的不同泪液蛋白组分。最明显的组分是溶菌酶(14kda)、血清白蛋白(64kda)和乳铁蛋白(85kda)。MGD患者的泪液蛋白谱显示乳铁蛋白和溶菌酶的强度降低,血清白蛋白的强度增加。

IPL治疗前的SDS-PAGE扫描


IPL治疗后泪液蛋白的扫描模式(如下图所示)显示溶菌酶、血清白蛋白、乳铁蛋白和所有其他组分均有明显改善。


IPL治疗后泪液蛋白的扫描模式


三、脂质测定


下图显示了对照组、IPL治疗前患者和治疗2周后患者的总脂质、胆固醇、甘油三酯和磷脂浓度的变化。IPL治疗后泪液总脂含量明显改善。治疗前对照组总脂含量分别为7.87±0.28、4.41±0.30(P<0.001),治疗后为6.60±0.38mg/ml(P<0.05)。


对照组泪液胆固醇浓度为3.99±0.54mg/ml,IPL治疗前后泪液胆固醇浓度分别为3.27±0.06(P<0.01)和3.65±0.05mg/ml(P<0.05),分别比对照组下降18.11%和8.41%。此外,IPL治疗后患者的泪液甘油三酯浓度与治疗前相比有显著改善(P<0.001)。


对照组、IPL治疗前和治疗后患者泪液甘油三酯值分别为2.8±0.16、2.46±0.23和2.65±0.23mg/ml。对照组磷脂浓度为1.81±0.12mg/ml,MGD患者为1.05±0.13mg/ml(下降百分比为42%;P<0.001),经IPL治疗后,磷脂浓度明显改善(1.53±0.24mg/ml),下降15.6%(P<0.01)。

IPL治疗前后的总脂质、胆固醇、甘油三酯和磷脂浓度的变化


四、磷脂薄层色谱法


如下图所示为薄层色谱法TLC分离的不同极性磷脂的浓度。对照组磷脂酰丝氨酸浓度为3.88±0.01μg/ml,MGD患者随后降至2.53±0.4μg/ml(P<0.001),IPL治疗后又上升至3.7±0.05μg/ml。MGD患者的磷脂酰肌醇浓度在IPL治疗后显著下降(P<0.001)和改善(P<0.05),分别为5.4±0.01、3.76±0.29和4.95±0.01μg/ml。


此外,MGD患者经IPL治疗后,磷脂酰乙醇胺浓度显著下降并完全改善(P>0.05),其值分别为4.46±0.02、3.13±0.02和4.45±0.04μg/ml。


最后,MGD患者的磷脂酰胆碱浓度与对照组相比无显著性下降(P>0.05),对照组为11.06±0.05,MGD患者为10.65±0.04μg/ml。治疗2周后,IPL诱导磷脂酰胆碱浓度升高(12.88±0.1μg/ml;P<0.05)。


IPL治疗前后不同极性磷脂的浓度对比


睑板腺分泌物质量的改变是MGD患者的主要特征。
因此,脂质成分的改变会导致脂质层不稳定以及功能丧失,出现眼表疾病症状。睑板腺导管阻塞会影响泪膜当中脂质层的厚度。泪膜表面脂质层变薄或丢失会直接导致泪液蒸发过强,最终导致干眼症。泪膜脂质层主要含有非极性&疏水性脂质,如胆固醇、甘油三酯等组成。此外,还存在少量的亲水性&极性脂质,如磷脂。泪膜脂质层中的极性脂质是泪膜功能的组成,因为非极性脂质无法覆盖整个泪膜,缺乏对表面张力变化作出弹性反应。


在本研究中,对总脂质、胆固醇、甘油三酯和磷脂进行了定量测量。数据表明,在IPL治疗后,MGD患者泪液中的总脂质、胆固醇、甘油三酯和磷脂的浓度显著升高。除此之外,MGD患者的泪液蛋白含量也有显著改善,提高了泪液的质量。