研究目的：
研究强脉冲光(IPL)对载脂蛋白E敲除小鼠(ApoE-/-)睑板腺(MGs)形态学和病理改变的间接影响，并探讨IPL的作用机制。

正文内容：
实验采用随机对照的模式对(ApoE-/-)小鼠进行不治疗和三次IPL的照射治疗，通过形态学分析、眼表染色、电镜分析以及免疫染色、Western blot和qRT–PCR检测上睑MGs的相关指标、基因和蛋白表达。

本文采用美迪信MDC公司研发生产的EYESIS光脉冲MGD治疗仪进行实验研究，IPL治疗的强度为12 J/cm2，每两周对两侧进行三次治疗，每次1次脉冲。IPL治疗应用于距离下眼睑盖缘3mm的皮肤，照射面积为小鼠面部1平方厘米。

实验结果一共分为六部分来展示IPL的临床机制
一、强脉冲光治疗后睑缘和眼表的变化：
经过三次EYESIS治疗，小鼠睑缘形态、腺口阻塞程度、睑板腺评分、眼表染色及评分都得到了相应的改善效果。

二、强脉冲光改善睑板腺口阻塞和睑板腺形态：
IPL治疗后，睑板腺堵塞的腺口重新打开，腺体肿胀减少。为了进一步证实，实验人员进行了H&E染色后组织学观察显示，IPL治疗导致堵塞的孔口重新打开。

三、强脉冲光对睑板腺脂质积累和线粒体超微结构的影响：
如图所示，采用ORO染色观察IPL治疗后脂质积聚的变化。经过治疗后，导致更多深染性脂质积聚在腺泡中。并且在透射电镜下观察发现，ApoE-/-小鼠腺泡细胞的细胞质中含有大量不规则形状的、增大的脂质。相比较ApoE-/-小鼠的线粒体，IPL治疗组的线粒体损伤减轻，排列规则。

四、强脉冲光降低促炎细胞因子水平和下调NF-κB信号通路：
结果表明，IPL治疗可降低炎症因子的水平(TNF-α、IL-17A和IL-6)，部分是通过使NF-κB途径失活来实现的。

五、强脉冲光可增加腺泡基底细胞的增殖，减少导管上皮的过度角化免疫染色：
结果显示，ApoE-/-小鼠腺泡基底层中的Ki67阳性细胞显著减少，而IPL处理后，Ki67阳性细胞增加，并呈稀疏排列在腺泡边缘。

六、强脉冲光对睑板腺氧化应激和细胞凋亡的影响：
与ApoE-/-小鼠相比，经IPL治疗的小鼠腺泡上皮细胞的NOX-4核染色减少，与WT小鼠的水平大致相同。另外，IPL降低MGs中的Caspase-3(凋亡细胞标志物)。

研究结果：
总之，EYESIS的光脉冲作用可以改善MGs的结构和功能，缓解MGD的发展，这可能与光生物调节(PBM)的间接作用有关。

其次，作者在文章中揭示了强脉冲光IPL的更深层作用机制，如图所示：

强脉冲光IPL不仅能够抑制睑板腺导管上皮过度角化、增加腺泡基底细胞的增殖能力，更重要的是，IPL通过照射眼睑组织细胞，能够间接恢复细胞中线粒体超微结构，并下调NF-κB来降低炎症因子水平，达到治疗MGD的目的。

值得关注的是，文章中还提到了关于强脉冲光IPL照射位置的反馈，在北京大学第一医院的研究中，EYESIS仅仅照射下眼睑下方的皮肤，即可在上眼睑和下眼睑都观察到了治疗效果，这些观察结果与MGD患者的临床治疗效果存在一致性（下图）。

当然，对于这些光脉冲的获益可能与光生物调节(PBM)的间接作用有关系。IPL的光谱包括红色到近红外光谱之间，虽然PBM在正常条件下会增加ROS含量，但将PBM输送到已经处于氧化应激状态的细胞，可诱导降低ROS浓度并抑制凋亡。

鉴于IPL的光谱特征，我们假设来自IPL的光子可能被细胞色素C氧化酶(COX)吸收，则这个过程可以增加ATP的生成并改变ROS的水平。这为今后IPL的作用机理研究提供了强有力的证据，也为IPL改善MGD的作用机制进行了更深入的剖析。